ОМ-БИОЧИП (ПСА)
Набор реагентов «ОМ-БИОЧИП (ПСА)» для одновременного количественного определения общей и свободной форм простат-специфического антигена методом иммуно-флуоресцентного анализа на биологическом микрочипе.
Преимущества тест-системы «ОМ-БИОЧИП(ПСА)»
Анализ двух форм ПСА на биочипе проводится в формате «один пациент - один биочип».
Чувствительность определения на биочипе составляет 0,3 нг/мл для ПСА общего и 0,2 нг/мл для ПСА cвободного.
Коэффициент вариации при измерениях внутри одной партии биочипов не превышает 10%.
Принцип работы - сэндвич-иммуноанализ с флуоресцентной регистрацией сигнала
Биочип содержит гелевые элементы с иммобилизованными моноклональными антителами против ПСАобщ и ПСАсвоб по 4 одинаковых ячейки в столбце. Иммобилизованные антитела против ПСАобщ в равной степени распознают и связывают как свободную форму ПСА, так и форму, связанную в комплекс с α1-антихимотрипсином. Иммобилизованные антитела против ПСАсвоб связывают только ПСА в свободной форме. В качестве проявляющих антител используют флуоресцентно меченые моноклональные антитела, одновременно распознающие как свободный ПСА, так и ПСА, связанный в комплекс. Интенсивность флуоресценции гелевых ячеек, содержащих антитела, пропорциональна концентрации ПСА в образце.
|
|
|
Схема иммуноанализа на биочипе
|
Помимо гелевых ячеек с иммобилизованными антителами, биочип содержит также ячейки с иммобилизованным антигеном (ПСА) в разных концентрациях.
При проведении анализа иммобилизованный ПСА взаимодействует с проявляющими антителами, при этом интенсивность флуоресцентных сигналов гелевых ячеек пропорциональна концентрации иммобилизованного ПСА.
Полученную зависимость используют в качестве индивидуального калибровочного графика на каждом биочипе (внутреннюю калибровочную кривую).
|
|
Увеличенная фотография биочипа
|
|
|
Флуоресцентное изображение биочипа
|
|
|
Трехмерная визуализация интенсивности флуоресценции в ячейках чипа
|
Порядок проведения анализа с использованием тест-системы «ОМ-БИОЧИП (ПСА)»
- К образцу сыворотки крови (50 мкл) добавляют проявляющие флуоресцентно-меченные антитела (10 мкл).
- Образец наносят на микрочип для анализа двух форм ПСА.
- Биочип инкубируют с исследуемым образцом. В процессе инкубации происходит взаимодействие ПСА из сыворотки крови с иммобилизованными на биочипе антителами и флуоресцентно-меченными антителами (сэндвич-иммуноанализ), а также взаимодействие флуоресцентно-меченных антител с иммобилизованным на чипе антигеном: получение внутренней калибровочной кривой.
- Получают флуоресцентные изображения биочипов с помощью биочип-анализатора.
- Расчет содержания ПСА в сыворотке крови с производится автоматически с помощью программы 'ImaGelAssay', разработанной в ИМБ РАН, по внутренней калибровочной кривой.
Отчет в специализированной программе ImaGelAssay
|
|
Обсчет результатов иммуноанализа
|
Результат анализа:
26/11/2006 10:22:11
Партия ?1
[ПСАобщ], нг/мл = 7.86
[ПСАсвоб], нг/мл = 1.88
([ПСАсвоб] / [ПСАобщ])% = 23.9
|
Сравнение с другими тест-системами
Результаты измерений на биочипе ПСАобщ и ПСАсвоб в образцах сыворотки крови здоровых доноров и больных имеют значения, близкие к полученным в стандартных системах.
ПСАобщ |
ПСАсвоб |
|
|
Состав тест-системы «ОМ-БИОЧИП(ПСА)»
|
|
фото коробки с чипами тест-системы «ОМ-БИОЧИП(ПСА)»
|
|
Почему это важно?
Простата-специфический антиген (ПСА) — серологический маркер рака предстательной железы, одной из наиболее распространенных форм рака у мужчин.
ПСА — высоко специфичный онкомаркер. Измерение концентраций двух форм ПСА, а также их соотношения в сыворотке крови больного позволяет проводить дифференциальную диагностику злокачественных и доброкачественных заболеваний предстательной железы.
|
|
Свободная форма ПСА
|
|
|
Комплекс ПСА с α1-антихимотрипсином (АХТ)
|
|
|
антитела к свободной форме ПСА
|
|
|
антитела к общей форме ПСА
|
|
|
проявляющие флуоресцентно-меченые
антитела к двум формам ПСА
|
Динамика заболеваемости населения России раком предстательной железы
Показатель заболеваемости (на 100000 населения)
Мужчины старше 50 лет составляют группу риска
|